Multispektrales bildbasiertes Durchfluss-Zytometer

Mit dem benötigten bild-basiertem Durchflusszytometer werden automatisiert mikroskopische Proben in einem Flüssigkeitsstrom vermessen und von jedem Partikel bis zu 12 Bilder, inkl. 2 Hellfeld-Aufnahmen, 9 multispektrale Fluoreszenzaufnahmen und 1 Streusignal aufgenommen. Die Laserkonfiguration des Gerätes soll eine Doppelauftragung von Ex 488 nm/ Em 670 BP vs. Ex 561 nm/ Em 670 BP ermöglichen, bei der die entsprechenden Signale von einer Zelle gleichzeitig aber separat gemessen werden sollen (nicht co-lineare Anordnung der Laser), zu der gleichzeitig Hellfeld- und Fluoreszenzaufnahmen angefertigt werden. Bei den zu untersuchenden Proben handelt es sich vorwiegend um autofluoreszente pflanzliche Zellen (Phytoplankton in Wasserproben und Pollen), aber auch Mikroplastik oder andere Umweltproben, sowie verschiedene Fluoreszenzfärbungen (z.B. DAPI, Nilrot, Lebend-Tot-Zellfärbung), welche möglich sein müssen. Für die Fluoreszenzfärbungen sollten die Proben möglichst wenig Bleaching-Effekten ausgesetzt sein. Mittels der Fotos ist es erforderlich eine Reihe von morphologischen Parametern, wie längste axiale Distanz, Fläche, Umfang, Kreisförmigkeit, etc. zu ermitteln um dadurch eine möglichst gute Unterscheidung von Zellen mit vergleichbaren Fluoreszenzeigenschaften aber unterschiedlicher Morphologie zu gewährleisten.